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色谱柱和层析柱是用于分离混合物的工具,虽然它们有相似之处,但存在一些本质区别。主要区别在于分离原理、应用范围、填料和操作条件。色谱柱利用色谱法分离混合物,该方法基于不同组分在固定相和流动相之间的分配系数不同。层析柱则***用层析法分离混合物,该方法依赖于不同组分在固定相上的吸附能力。
注意事项如下:选择合适的柱子和填料 柱层析法是一种常用的分离技术,选择合适的柱子和填料至关重要。柱子应具备一定的强度和稳定性,以确保在操作过程中不会破裂或变形。填料的选择应根据待分离物质的性质进行,不同的填料具有不同的分离效果和适用范围。
最后,***用16Mpa压力进行层析分离,通过TLC检测,分段合并浓缩,得到目标段的浓缩物,通过丙酮-石油醚结晶、抽滤、干燥,最终获得紫杉醇含量≥95%的成品。在去除胶质的过程中,***用高压硅胶层析柱进行层析,同时将紫杉烷化合物分离为紫杉醇、三尖杉宁碱、7-表紫杉醇三部分。
在实际操作中,硅胶柱层析包括多个步骤。首先,根据样品量称量硅胶,通常硅胶的量为上样量的30-70倍,或更高。其次,将硅胶与溶剂搅拌成匀浆。搅拌时应使用与洗脱剂相配伍的溶剂,如石油醚、乙酸乙酯或丙酮等。如果样品对酸敏感,应避免使用含有醇的氯仿体系。
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